第九章 化学治疗药物实验
第一节 青霉素的抑菌实验
【实验目的】
1.肉汤稀释法观察青霉素的抗菌作用。
2.练习测定青霉素抗金黄色葡萄球菌的最低浓度。
【实验原理】
青霉素的药理作用是干扰细菌细胞壁的合成。青霉素的结构与细胞壁的成分黏肽结构中的D-丙氨酰-D-丙氨酸近似，可与后者竞争转肽酶，阻碍黏肽的形成，造成细胞壁的缺损，使细菌失去细胞壁的渗透屏障，对细菌起到杀灭作用，为窄谱抗生素，对革兰阳性菌具有较强的抗菌作用。抗菌效果随药物浓度不同差别较大，达不到足够浓度抗菌疗效差，且易耐药，影响药效延误病情，所以验证抗菌浓度至关重要。
【实验条件】
1.药品
金黄色葡萄球菌肉汤培养基、普通肉汤培养基、青霉素64U/mL的普通肉汤培养基。
2.器材
麦氏比浊管、1mL刻度吸管（灭菌）和橡皮胶头。
【实验方法】
取9只麦氏比浊管编号，每支管中加入普通肉汤培养基1mL，在1号管内加入含64U/mL青霉素肉汤培养基1mL，混匀后吸取1mL到2号管，混匀，从2号管中再取1mL加至3号管，再吸取1mL加至4号管，以此操作直到8号管为止。9号管不加含青霉素的肉汤培养基作为对照管。然后1～9号每只管中加入0.1mL含菌量相当于麦氏比浊管第1管1.2倍的金黄色葡萄球菌（相当于1.5×109/mL）。将麦氏比浊管放入35℃的温箱中16～18小时，然后观察每只麦氏比浊管的浑浊情况，并将观察结果写于实验结果中。
【实验结果】
见表1-9-1-1。
表1-9-1-1 青霉素的抑菌实验结果
【注意事项】
1.操作要在无菌状态环境中，且操作人员手要戴无菌手套。
2.在吸取药液时药量要准确，以免剂量不准带来误差。
【思考题】
青霉素使用时的注意事项有哪些？
第二节 注射用乳糖酸红霉素溶解性实验
【实验目的】
1.观察生理盐水对乳糖酸红霉素溶解性的影响。
2.练习注射液的配伍操作过程。
【实验原理】
乳糖酸红霉素为含有电荷的大分子药物，溶解在0.9%氯化钠的电解质注射液中可产生盐析作用，使乳糖酸红霉素溶解度降低而产生沉淀，在溶解前用少量的注射用水或5%葡萄糖注射液溶解稀释，然后加入生理盐水注射液中可避免盐析的沉淀现象。
【实验条件】
1.药品
乳糖酸红霉素、生理盐水、5%葡萄糖注射液、注射用水。
2.器材
试管。
【实验方法】
取3支试管进行编号，首先分别加入乳糖酸红霉素120mg。1号试管中加入生理盐水2mL，振摇1分钟，观察是否溶解，再加入4mL水，振摇，观察是否溶解。2号试管中加入5%葡萄糖注射液2mL，振摇1分钟，观察是否溶解，再加入4mL水，振摇，观察是否溶解。3号试管中加入注射用水2mL，振摇1分钟，观察是否溶解，再加入4mL生理盐水，振摇，观察是否溶解。
【实验结果】
见表1-9-2-1。
表1-9-2-1 注射用乳糖酸红霉素溶解性实验结果
【注意事项】
仔细观察每支试管中溶解有何区别。
【思考题】
所学药物中，有哪些药物对溶剂有特殊要求？
第三节 链霉素的毒性反应及其解救
【实验目的】
1.观察链霉素的中毒反应。
2.掌握链霉素中毒的抢救方法。
【实验原理】
链霉素具有类似箭毒阻滞乙酰胆碱和络合Ca2+的作用，能引起神经肌肉阻滞，钙剂可拮抗此作用。
【实验动物】
家兔。
【实验条件】
1.药品
25%硫酸链霉素溶液、10%葡萄糖酸钙溶液或5%氯化钙溶液、生理盐水。
2.器材
电子秤、剪刀、注射器（10mL）、棉球。
【实验方法】
取家兔2只，称重、编号，观察并记录家兔的呼吸、翻正反射和四肢肌肉张力。两兔分别肌内注射硫酸链霉素l.6mL/kg，给药后观察家兔的反应。当出现呼吸麻痹时，1号兔耳缘静脉注射10%葡萄糖酸钙溶液2.5mL/kg或5%氯化钙溶液1.6mL/kg，2号兔耳缘静脉注射等量生理盐水作为对照，观察两兔反应的差别。
【实验结果】
见表1-9-3-1。
表1-9-3-1 链霉素的毒性反应及其解救实验结果
【注意事项】
家兔进行链霉素肌内注射后，一般在用药后30～60分钟出现反应，并逐渐加重，一旦出现明显中毒症状应立即抢救，否则可引起动物死亡。氯化钙溶液应缓慢静脉注射，避免导致家兔发生高钙惊厥。
【思考题】
1.链霉素的不良反应有哪些？
2.链霉素中毒应如何抢救？
第四节 溶液pH对磺胺类药物溶解度的影响
【实验目的】
1.观察磺胺类药物在不同pH下的溶解现象。
2.练习磺胺类药物溶解操作方法，掌握磺胺类药物对肾脏损害及处理措施。
【实验原理】
磺胺类药物在碱性环境中溶解度大，而在酸性条件下不易溶解，并析出结晶产生沉淀。本实验通过调整不同溶液pH，观察对磺胺类药物溶解度的影响，加深理解磺胺类药物通过肾排泄时尿液pH与其不良反应的关系。
【实验条件】
1.药品
1mol/L醋酸溶液、磺胺嘧啶、1mol/L氢氧化钠溶液。
2.器材
试管、pH试纸、滴管。
【实验方法】
1.取清洁试管1支，加入磺胺嘧啶粉末10mg，再加入蒸馏水3mL，充分振摇，观察溶解情况。
2.向试管内逐滴加入1mol/L氢氧化钠溶液，边滴边振摇，观察溶解情况。当试管内粉末完全溶解时，记录加入的氢氧化钠溶液滴数，并使用pH试纸测其pH，记录于实验结果中。
3.向试管内逐滴加入1mol/L醋酸溶液，随加随振摇，观察试管内溶液变化情况。当试管内有固体析出时，记录加入的醋酸滴数，并使用pH试纸测pH，记录于实验结果中。
4.继续向试管内逐滴加入1mol/L醋酸溶液，随加随振摇，至固体析出不再增多时，记录此时加入的醋酸滴数，并使用pH试纸测pH，记录于实验结果。
【实验结果】
见表1-9-4-1。
表1-9-4-1 溶液pH对磺胺类药物溶解度的影响实验结果
【注意事项】
1.可用同摩尔浓度的稀硝酸或稀硫酸替代醋酸，效果更好，但需注意实验安全。
2.由于磺胺嘧啶易溶于稀盐酸，故不可用稀盐酸进行酸化实验。
【思考题】
若向溶有磺胺嘧啶的氢氧化钠溶液逐渐滴加稀盐酸至过量，将会观察到何种现象？